Kryoprotektivní účinky modifikovaných ředidel drůbežího spermatu

Cílem práce bylo hodnocení vybraných parametrů inseminačních dávek (ID) původního plemene česká slepice zlatá kropenatá. Od 4 vybraných kohoutů byly získávány vzorky ejakulátu po dobu 2 měsíců. ID byly vyráběny bezprostředně po odběru za použití komerčních ředidel spermatu drůbeže určeného ke chlazení s přídavkem předem definovaného kryoprotektantu. Před mrazením a po rozmrazení ID byla hodnocena celková pohyblivost (MOT) a integrita plazmatické membrány a akrozomu (VIA).

posledním klasickým představitelem původních středoevropských selských slepic lehkého typu s unikátním zbarvením  Je mimořádně vhodné pro podmínky tradičně pojatých volných či ekologických chovů. Od roku 1996 je plemeno zařazeno do programu ochrany původních plemen, od roku 2006 je součástí národního programu pro záchranu a uchovávání zemědělské rozmanitosti.

Směsný vzorek ejakulátu kohotů byl naředěn v komerčně dostupných ředidlech Poultry media® (IMV Technologies, L’Aigle, Francie), Raptac® (AMP-Lab, GmbH, Německo) a NeXcell® (IMV Technologies, L’Aigle, Francie) na finální koncentraci 100 × 106/ml buněk a obohacen o kryoprotektant N-methylacetamid (NMA) o koncentraci 9 %  Inseminační dávky byly zmrazeny v 0,25 ml plastových pejetách francouzského typu (IMV Technologies, L’Aigle, Francie). Pejety byly umístěny v  kapalném dusíku k dlouhodobému uchování.

Pro stanovení kvality ID byly pejety rozmrazeny ve vodní lázni temperované na 5 °C po dobu 100 s a následně hodnoceny funkční parametry spermií, jako je životaschopnost (VIA) a celková pohyblivost (MOT). Tyto parametry byly hodnoceny pomocí průtokové cytometrie (NovoCyte 3000®, Acea Biosciences, Agilent, Santa Clara, California, USA) a mobilního – mCASA analyzátoru (iSperm®, Aidmics Biotechnology, Taipei City, Taiwan). Data byla vyhodnocena ve statistickém programu SAS (SAS/STAT, 2011). Významnost rozdílů mezi jednotlivými ředidly byla testována pomocí Tukey-Kramerova testu. Rozdíly mezi skupinami byly statisticky významné (P <0,05).

Tato studie navrhuje primární postup kryokonzervace kohoutích spermií pro vytvoření genového rezervoáru původního českého plemene za použití komerčních ředidel. Z důvodu absence ředidel pro dlouhodobou konzervaci byla testována ředidla určená pro konzervaci krátkodobou, která v důsledku jejich modifikace 9% NMA vykazovala v procesu kryokonzervace příznivé výsledky. Budoucí výzkum této problematiky by měl být zaměřen na následnou optimalizaci mrazení ID testováním dalších modifikací a ověření výsledků in vitro technikou umělé inseminace. Takto lze vytvořit důležitý nástroj pro postup kryokonzervace spermatu původního českého plemene drůbeže.

Ing. Martina Janošíková, Ph.D., Ing. Martin Ptáček, Ph.D., Ing. Filipp Georgijevič Savvulidi, Ph.D., doc. Ing. Lukáš Zita, Ph.D., Ing. Kristýna Petričáková, Katedra chovu hospodářských zvířat, FAPPZ, ČZU v Praze

 Podrobněji v časopisu Náš chov 11/2022.

Napsat komentář

Napsat komentář

deník / newsletter

Odesláním souhlasíte se zpracováním osobních údajů za účelem zasílání obchodních sdělení.
Copyright © 2024 Profi Press s.r.o.
crossmenuchevron-down